20世紀40年代初，國際局勢風云突變，古老的中華民族更到了生死存亡的危急時刻。在日寇的鐵蹄恣意肆虐之下，無數中華兒女拋頭顱灑熱血，卻也有那茍且偷生之人為了一己私利投敵叛國。國民黨軍統上海站站長侯坤的叛變，令抗戰局勢出現前所未有的危機。國民黨和共產黨雙方相機而動，急欲出去危害抗戰大業的漢奸叛徒。軍統方面由顧雪峰帶隊，組建了代號“十三釵”的行動小組，劍鋒直指漢奸鄒博庵（李竹 飾）及侯坤。李鳳凰（韓雪 飾）、徐子晏（徐百卉 飾）、歐陽琴（趙兆 飾）這群十三釵的姑娘身懷絕技，獨立堅韌，在一系列與對手交戰的過程中，她們還意外結識偽裝成牙醫的地下黨員郭春光（李超 飾）。　　各路人馬攪在一起，暗潮涌動，而十三釵的一號人物遲遲不曾露面，與此同時，日軍方面也悄悄展開一個險惡的計劃……

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